荧光显微镜概述
荧光显微镜与普通光学显微镜不同,它不是通过普通光源的照明观察标本,而是利用一定波长的光(通常是紫外光或蓝紫光)激发显微镜下标本内的荧光物质,使之发朗荧光,呈现荧光映像。所以,荧光显微镜的光源所起的作用不是直接照明,而是作为一种激发标本内的荧光物质的能源。我们之所以能观察标本,不是由于光源的照明,而是标本内荧光物质吸收激发光的光能后所呈现的荧光映像。
由此可如,荧光显微镜的特点,主要是它的光源能供结大量特定波长范围的激发光,使受检标本内的荧光物质能获得必要强度的激发光。同时,荧光显微镜必须具有相应的滤片系统。一组滤片安装在激发光源和显微镜之间的光路中,它们可选样性地使激发光源的特定波长范围的光通过,作为激发光,这种滤片称为激发滤片。一组滤片安装在目镜和物镜之间的光路中,这组滤片允许荧光通过,但吸收视野内未转化为荧光的激发光,从而保护观察吝的眼睛。这种滤片称为阻断滤片或吸收滤片。
此外,还有吸热底片和吸收紫外线滤片,吸收光源的热量和吸收紫外光允许可见光通过。这两种滤片也安装在光源和显微镜之间的光路中。后者吸收紫外光允许可见光(白光)通过,这样使茨光显微镜可作为普通显微镜使用。由于荧光显微镜光源的光度强,一般均附有不同强度的小性灰滤片,可减弱光源约强度。团此,荧光显微镜包括光源、滤片系统和显微镜三个部分(图3)。
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